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              89Zr標記干細胞及SD大鼠PET/CT顯像
              發表時間:2018-04-20
              目的:89Zr標記干細胞及小動物PET/CT掃描研究89Zr-干細胞在正常SD大鼠體內分布特征,為干細胞活體分布研究提供依據。
               
              實驗方法: 
              89Zr標記干細胞和質量控制
              干細胞的89Zr標記:干細胞通過去鐵胺DFO與89Zr連接,從而實現干細胞的標記。通過緩沖液多次離心洗滌89Zr標記細胞,去除游離89Zr,獲得89Zr-干細胞。
              質量控制:離心收集89Zr-干細胞沉淀和上清液,使用γ計數的方法分別檢測89Zr-干細胞沉淀和上清液中的放射性劑量,以89Zr-干細胞沉淀所占總放射性百分比作為89Zr-干細胞的放射性化學純度。
               
              小動物PET/CT掃描
              4只正常SD大鼠尾靜脈單次注射89Zr-干細胞15.29±0.65 μCi,隨后在不同時間點(1 h至504 h)分別進行小動物PET/CT掃描(掃描時間:10-30 min)。掃描采集結束后,對PET圖像進行分析,勾畫心、肝、肺、腎、骨關節、肌肉和腦為感興趣區域(Region of Interest,ROI),計算%ID/g值,進而分析89Zr-干細胞在正常SD大鼠體內主要臟器的分布情況。
               
              實驗結果:
              標記和質控
              檢測結果顯示89Zr-干細胞的化學純度為84.4%。使用臺盼藍染色法檢測89Zr-干細胞的細胞活率為68.75%。
              體外增殖實驗:使用CCK-8試劑盒對干細胞和89Zr-干細胞的增殖能力進行評價,89Zr-干細胞在體外具有增殖能力,但增殖速度低于干細胞,結果見圖1。
              圖1: 89Zr-干細胞增殖實驗結果
               
               
              小動物PET/CT掃描結果
              圖2:正常SD大鼠靜脈給予89Zr-干細胞后不同時間點的小動物PET/CT掃描MIP圖
               
              正常SD大鼠注射89Zr-干細胞后,主要分布于肺、肝和心等臟器。在肺部的攝取值最高(1 h時肺部%ID/g值最高,為12.06±1.73),并隨時間的延長逐漸降低。在1 h至24 h內,部分腸有高攝取,攝取值在1 h時最高,%ID/g值為4.50±2.75;72 h時,腸攝取值快速下降后趨于穩定。在1 h至504 h內,肝臟的攝取值呈現先升高后下降的趨勢,攝取值最高時間點為24 h,%ID/g值1.89±0.62。心臟的攝取值變化趨勢與肺部一致,隨時間的延長而逐漸降低,最高攝取時間點為1 h,攝取值%ID/g為0.59±0.24。
               
              結論
              建立89Zr標記干細胞的有效方法,并對標記后干細胞的活率和增殖能力進行檢測。通過小動物PET/CT顯像觀察89Zr-干細胞在正常SD大鼠體內的分布發現,干細胞經尾靜脈注射后主要分布于肺、肝和心等臟器。該方法可為研究干細胞在體內分布提供依據。

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